三气培养箱的使用技巧

三气培养箱（CO₂、O₂、N₂）是细胞培养和微生物研究的重要设备，掌握正确的使用技巧对保证实验效果至关重要。

一、基础操作技巧

1. 开机前准备

使用前检查气瓶压力是否充足（建议不低于0.2MPa），确保气体管路连接牢固无泄漏。检查水箱水位，使用纯净水或蒸馏水，避免使用自来水防止水垢堵塞。开机后预热至少2小时，待温湿度稳定后再放入样品。

2. 气体浓度设定

根据细胞类型设定合适的气体浓度：CO₂通常设定在5%，O₂根据需求设定（常氧21%或低氧1-5%），N₂作为平衡气体。设定时应先设定温度，待温度稳定后再设定气体浓度，避免频繁调整。

3. 样品放置规范

样品应均匀放置在搁板上，与箱壁保持至少50mm距离，确保气流循环畅通。样品总容积不应超过工作室容积的2/3，避免影响温湿度和气体浓度的均匀性。不同实验的样品应分区放置，做好标记。

二、气体控制技巧

1. CO₂控制

CO₂浓度波动应控制在±0.1%以内，定期用CO₂检测仪校准传感器。当CO₂浓度设定值低于5%时，应适当降低O₂浓度或增加N₂流量。培养箱门开启时间不宜过长，每次不超过30秒，防止气体浓度大幅波动。

2. O₂控制

低氧培养时，O₂浓度应缓慢降低（建议每小时降低1-2%），避免细胞应激反应。高氧培养时，O₂浓度不宜超过50%，防止氧自由基损伤细胞。O₂传感器应定期校准，确保测量准确。

3. 气体消耗管理

根据培养箱容积和开门频率合理设定气体流量，避免浪费。定期检查气瓶压力，当压力低于0.2MPa时应及时更换。长时间不使用时，应关闭气源阀门，防止气体泄漏。

三、温湿度控制技巧

1. 温度控制

温度设定范围通常为室温+5℃至60℃，温度波动应控制在±0.5℃以内。高温培养时，设定温度不宜超过50℃，防止细胞损伤。低温培养时，当温度低于30℃时，应适当降低湿度，防止结露。

2. 湿度控制

湿度通常设定在85-95%RH，使用纯净水加湿，定期清洗加湿水盘。当湿度设定值低于50%RH时，应先设定温度再设定湿度。高湿培养时，应确保箱体密封良好，防止湿气外泄。

四、维护保养技巧

1. 日常清洁

每次使用后清洁工作室内部，用75%酒精擦拭箱壁和搁板。每周清洗加湿水盘，防止水垢和微生物滋生。每月清洁冷凝器和过滤器，保持散热良好。

2. 定期消毒

每周用紫外线照射30分钟或75%酒精喷雾消毒。每季度进行一次深度清洁，包括气体管路、传感器、加湿系统的检查和维护。每年由专业人员进行全面校准和保养。

3. 长期停用处理

设备长期停用时，应切断电源和气源，清洁箱体内部，保持干燥。加湿器内的水应排空，防止滋生细菌。定期（每季度）通电运行2-3小时，驱除电器部分潮气。